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SyiHend Amino Acid氨基酸分析柱測定阿膠的含量

更新時間:2024-07-19   點(diǎn)擊次數(shù):263次

色譜條件:

流動相:

1、色譜柱:SyiHend Amino Acid 4.6*250mm 5µm

流動相A: 0.1mol/L醋酸鈉溶液(pH 6.5):乙睛=93.0:7.0

配制方法:準(zhǔn)確稱取無水醋酸鈉8.203g于1000mL水中,攪拌均勻,使之溶解,用冰醋酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6.50;準(zhǔn)確量取配制好的三水合醋酸鈉溶液930mL和乙腈70mL,混合均勻,抽濾過0.22µm濾膜;  

流動相B:水:乙腈=20.0:80.0

配制方法:準(zhǔn)確量取水200mL和乙腈800mL,混合均勻,抽濾過0.22µm濾膜;

梯度方法:

2. 梯度程序:

流動相A: 0.1mol/L醋酸鈉溶液(pH 6.50):乙睛=93:7

流動相B: 水:乙腈=20:80

T(min)                    A%                     B%

0.0                       100.0                      0.0

11                        93.0                       7.0

13.9                      88.0                    12.0

14                        85.0                    15.0

29                        66.0                    34.0

30                         0.0                       100.0

35                         0.0                       100.0

35.1                       100.0                       0.0   

45                         100.0                       0.0

流 速:1.0mL/min

柱 溫:43℃

 波  長:254nm

 進(jìn)樣量:5μL 

3、樣品制備衍生過程。

精密量取對照溶液5ml,加入25ml量瓶中,加入0.1mol/L異硫氰酸苯酯的乙腈溶液2.5ml,1.0mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5ml,搖勻,室溫放置1小時后,加入50%乙腈水至刻度,搖勻,取10ml,加正己烷10ml,振搖,放置10分鐘。取下層溶液,過濾,取續(xù)濾液,即得。

4、色譜圖:

圖1、樣品衍生后

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 圖2:取樣品溶液1ml加50%乙腈水稀釋1倍。(由于衍生試劑濃度過大造成樣品測定過載,形成峰分叉,樣品稀釋1倍后測定)

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